本发明提供了一种含有银杏酵素的护肤液及其制备方法和应用。该含有银杏酵素的护肤液的组成包括银杏酵素和护肤基质。通过将复合菌种接种至银杏种仁、果蔬及中草药辅料等原料中，搅拌均匀后密闭，避光发酵，静置并过滤去除发酵残渣后制得银杏酵素，再向该银杏酵素中加入护肤基质得到该含有银杏酵素的护肤液。本发明提供的含有银杏酵素的护肤液未添加任何防腐剂成分，对皮肤不刺激，可以保护真皮层细胞，改善血液循环，防止细胞被氧化产生皱纹；同时还可以阻碍色素在真皮层的形成与沉着，起到美白肌肤与防治色素斑块的作用。本发明还公开了含有银杏酵素的护肤液在美容面膜中的应用。